ಅಸ್ಥಿಸಂಧಿವಾತ (OA) ದೀರ್ಘಕಾಲದ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕ್ಷೀಣಗೊಳ್ಳುವ ಮೂಳೆ ಜಂಟಿ ಕಾಯಿಲೆಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ, ಇದು 65 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ವಯಸ್ಸಿನ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ.
1]. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, OA ರೋಗಿಗಳಿಗೆ ಹಾನಿಗೊಳಗಾದ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್, ಉರಿಯೂತದ ಸೈನೋವಿಯಂ ಮತ್ತು ಸವೆತಗೊಂಡ ಕೊಂಡ್ರೊಸೈಟ್‌ಗಳು ಎಂದು ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ನೋವು ಮತ್ತು ದೈಹಿಕ ತೊಂದರೆಗಳನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುತ್ತದೆ.
2]. ಸಂಧಿವಾತದ ನೋವು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಉರಿಯೂತದಿಂದ ಕೀಲುಗಳಲ್ಲಿನ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ನ ಅವನತಿಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಗಂಭೀರವಾಗಿ ಹಾನಿಗೊಳಗಾದಾಗ ಮೂಳೆಗಳು ಪರಸ್ಪರ ಡಿಕ್ಕಿ ಹೊಡೆದು ಅಸಹನೀಯ ನೋವು ಮತ್ತು ದೈಹಿಕ ತೊಂದರೆಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು.
3]. ನೋವು, ಊತ ಮತ್ತು ಜಂಟಿ ಬಿಗಿತದಂತಹ ರೋಗಲಕ್ಷಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಉರಿಯೂತದ ಮಧ್ಯವರ್ತಿಗಳ ಒಳಗೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ. OA ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ, ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಮತ್ತು ಸಬ್‌ಕಾಂಡ್ರಲ್ ಮೂಳೆಯ ಸವೆತಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಉರಿಯೂತದ ಸೈಟೊಕಿನ್‌ಗಳು ಸೈನೋವಿಯಲ್ ದ್ರವದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ.
4]. OA ರೋಗಿಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೊಂದಿರುವ ಎರಡು ಪ್ರಮುಖ ದೂರುಗಳೆಂದರೆ ನೋವು ಮತ್ತು ಸೈನೋವಿಯಲ್ ಉರಿಯೂತ. ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರಸ್ತುತ OA ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಗುರಿಗಳು ನೋವು ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು. [
5]. ಸ್ಟಿರಾಯ್ಡ್ ಅಲ್ಲದ ಮತ್ತು ಸ್ಟೀರಾಯ್ಡ್ ಔಷಧಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ ಲಭ್ಯವಿರುವ OA ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳು ನೋವು ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತವನ್ನು ನಿವಾರಿಸುವಲ್ಲಿ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಿದ್ದರೂ, ಈ ಔಷಧಿಗಳ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಬಳಕೆಯು ಹೃದಯರಕ್ತನಾಳದ, ಜಠರ-ಕರುಳು ಮತ್ತು ಮೂತ್ರಪಿಂಡದ ಅಪಸಾಮಾನ್ಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಂತಹ ತೀವ್ರ ಆರೋಗ್ಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ.
6]. ಹೀಗಾಗಿ, ಅಸ್ಥಿಸಂಧಿವಾತದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಅಡ್ಡ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಔಷಧವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ.
ನೈಸರ್ಗಿಕ ಆರೋಗ್ಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು ಸುರಕ್ಷಿತ ಮತ್ತು ಸುಲಭವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಾಗಲು ಹೆಚ್ಚು ಜನಪ್ರಿಯವಾಗುತ್ತಿವೆ [
7]. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಕೊರಿಯನ್ ಔಷಧಿಗಳು ಸಂಧಿವಾತ ಸೇರಿದಂತೆ ಹಲವಾರು ಉರಿಯೂತದ ಕಾಯಿಲೆಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಿವೆ.
8]. ಆಕ್ಲಾಂಡಿಯಾ ಲಪ್ಪಾ DC. ಅದರ ಔಷಧೀಯ ಗುಣಗಳಿಗೆ ಹೆಸರುವಾಸಿಯಾಗಿದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ನೋವು ನಿವಾರಣೆ ಮತ್ತು ಹೊಟ್ಟೆಯನ್ನು ಶಮನಗೊಳಿಸಲು ಕಿಯ ರಕ್ತಪರಿಚಲನೆಯನ್ನು ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕವಾಗಿ ನೈಸರ್ಗಿಕ ನೋವು ನಿವಾರಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ [
9]. ಹಿಂದಿನ ವರದಿಗಳು A. ಲಪ್ಪಾ ಉರಿಯೂತದ [
10,
11], ನೋವು ನಿವಾರಕ [
12], ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ವಿರೋಧಿ [
13], ಮತ್ತು ಗ್ಯಾಸ್ಟ್ರೋಪ್ರೊಟೆಕ್ಟಿವ್ [
14] ಪರಿಣಾಮಗಳು. A. ಲ್ಯಾಪ್ಪಾದ ವಿವಿಧ ಜೈವಿಕ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳು ಅದರ ಪ್ರಮುಖ ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತವೆ: ಕಾಸ್ಟುನೊಲೈಡ್, ಡಿಹೈಡ್ರೊಕೊಸ್ಟಸ್ ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್, ಡೈಹೈಡ್ರೊಕೊಸ್ಟುನೊಲೈಡ್, ಕಾಸ್ಟುಸ್ಲಾಕ್ಟೋನ್, α-ಕೋಸ್ಟಾಲ್, ಸಾಸುರಿಯಾ ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್ ಮತ್ತು ಕಾಸ್ಟುಸ್ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್ [
15]. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಕೋಸ್ಟುನೊಲೈಡ್ ಲಿಪೊಪೊಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್ (LPS) ನಲ್ಲಿ ಉರಿಯೂತದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ ಎಂದು ಹೇಳುತ್ತದೆ, ಇದು NF-kB ಮತ್ತು ಶಾಖ ಆಘಾತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಾರ್ಗದ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಮೂಲಕ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಫೇಜ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸಿತು.
16,
17]. ಆದಾಗ್ಯೂ, OA ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ A. ಲಪ್ಪಾ ಸಂಭಾವ್ಯ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ಯಾವುದೇ ಅಧ್ಯಯನವು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿಲ್ಲ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸಂಶೋಧನೆಯು (ಮೊನೊಸೋಡಿಯಂ-ಅಯೋಡೋಅಸೆಟೇಟ್) MIA ಮತ್ತು ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ-ಪ್ರೇರಿತ ದಂಶಕ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು OA ವಿರುದ್ಧ A. ಲ್ಯಾಪ್ಪಾದ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದೆ.
ಮೊನೊಸೋಡಿಯಂ-ಅಯೋಡೋಅಸೆಟೇಟ್ (MIA) ಅನ್ನು ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ನೋವು ನಡವಳಿಕೆಗಳು ಮತ್ತು OA ಯ ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಪ್ರಸಿದ್ಧವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
18,
19,
20]. ಮೊಣಕಾಲಿನ ಕೀಲುಗಳಿಗೆ ಇಂಜೆಕ್ಟ್ ಮಾಡಿದಾಗ, MIA ಕೊಂಡ್ರೊಸೈಟ್ ಚಯಾಪಚಯವನ್ನು ಅಸ್ತವ್ಯಸ್ತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತದ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಮತ್ತು ಸಬ್‌ಕಾಂಡ್ರಲ್ ಮೂಳೆ ಸವೆತ, OA ಯ ಕಾರ್ಡಿನಲ್ ಲಕ್ಷಣಗಳು.
18]. ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲದೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಚೋದಿತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಉರಿಯೂತದ ನೋವನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅಳೆಯಬಹುದಾದ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿನ ಬಾಹ್ಯ ನೋವಿನ ಸಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಎಂದು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ [
19]. ಮೌಸ್ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಫೇಜ್ ಸೆಲ್ ಲೈನ್, RAW264.7, ಉರಿಯೂತಕ್ಕೆ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಜನಪ್ರಿಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. LPS ನೊಂದಿಗೆ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ, RAW264 ಮ್ಯಾಕ್ರೋಫೇಜ್‌ಗಳು ಉರಿಯೂತದ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ಮತ್ತು IL-6 [ನಂತಹ ಹಲವಾರು ಉರಿಯೂತದ ಮಧ್ಯವರ್ತಿಗಳನ್ನು ಸ್ರವಿಸುತ್ತದೆ.
20]. ಈ ಅಧ್ಯಯನವು MIA ಪ್ರಾಣಿ ಮಾದರಿ, ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರಾಣಿ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು LPS-ಸಕ್ರಿಯ RAW264.7 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ OA ವಿರುದ್ಧ A. ಲ್ಯಾಪ್ಪಾದ ವಿರೋಧಿ ನೊಸೆಸೆಪ್ಟಿವ್ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತದ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿದೆ.
2. ವಸ್ತುಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳು
2.1. ಸಸ್ಯ ವಸ್ತು
ಎ.ಲಪ್ಪ ಡಿಸಿಯ ಒಣಗಿದ ಬೇರು. ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಎಪುಲಿಪ್ ಫಾರ್ಮಾಸ್ಯುಟಿಕಲ್ ಕಂ, ಲಿಮಿಟೆಡ್, (ಸಿಯೋಲ್, ಕೊರಿಯಾ) ನಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಗಚೋನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕೊರಿಯನ್ ಮೆಡಿಸಿನ್ ಕರ್ನಲ್ ಆಫ್ ಹರ್ಬಲ್ ಫಾರ್ಮಕಾಲಜಿ ವಿಭಾಗದ ಪ್ರೊ. ಡೊಂಗುನ್ ಲೀ ಇದನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದ್ದಾರೆ ಮತ್ತು ವೋಚರ್ ಮಾದರಿ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು 18060301 ಎಂದು ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
2.2 A. ಲ್ಯಾಪ್ಪಾ ಸಾರದ HPLC ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
A. ಲಪ್ಪಾವನ್ನು ರಿಫ್ಲಕ್ಸ್ ಉಪಕರಣವನ್ನು ಬಳಸಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು (ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರು, 100 °C ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂ). ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ-ಒತ್ತಡದ ಬಾಷ್ಪೀಕರಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಘನೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. A. ಲಪ್ಪಾ ಸಾರವು −80 °C ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಫ್ರೀಜ್-ಒಣಗಿದ ನಂತರ 44.69% ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿತ್ತು. 1260 ಇನ್ಫಿನಿಟಿⅡ HPLC-ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಎಜಿಲೆಂಟ್, ಪಾಲ್ ಆಲ್ಟೊ, CA, USA) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಂಪರ್ಕಿತವಾಗಿರುವ HPLC ಯೊಂದಿಗೆ A. ಲ್ಯಾಪ್ಪಾದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಕ್ರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ, EclipseXDB C18 ಕಾಲಮ್ (4.6 × 250 mm, 5 µm, ಎಜಿಲೆಂಟ್) ಅನ್ನು 35 °C ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗಿದೆ. ಒಟ್ಟು 100 ಮಿಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು 10 ಮಿಲಿ 50% ಮೆಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸೋನಿಕೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. 0.45 μm ನ ಸಿರಿಂಜ್ ಫಿಲ್ಟರ್ (ವಾಟರ್ಸ್ ಕಾರ್ಪೊರೇಷನ್, ಮಿಲ್ಫೋರ್ಡ್, MA, USA) ಮೂಲಕ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ಸಂಯೋಜನೆಯು 0.1% ಫಾಸ್ಪರಿಕ್ ಆಮ್ಲ (A) ಮತ್ತು ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್ (B) ಮತ್ತು ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಎಲಿಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ: 0-60 ನಿಮಿಷ, 0%; 60-65 ನಿಮಿಷ, 100%; 65-67 ನಿಮಿಷ, 100%; 67-72 ನಿಮಿಷ, 0% ದ್ರಾವಕ B 1.0 mL/min ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣದೊಂದಿಗೆ. 10 μL ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು 210 nm ನಲ್ಲಿ ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮೂರು ಬಾರಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು.
2.3 ಪ್ರಾಣಿಗಳ ವಸತಿ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆ
5 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸಿನ ಗಂಡು ಸ್ಪ್ರಾಗ್-ಡಾವ್ಲಿ (SD) ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು 6 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸಿನ ಗಂಡು ICR ಇಲಿಗಳನ್ನು Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) ನಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸ್ಥಿರ ತಾಪಮಾನ (22 ± 2 °C) ಮತ್ತು ಆರ್ದ್ರತೆ (55 ± 10%) ಮತ್ತು 12/12 h ನ ಬೆಳಕು/ಗಾಢ ಚಕ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಕೋಣೆಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವ ಮೊದಲು ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಒಂದು ವಾರಕ್ಕೂ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಯ ಪರಿಚಯವಿತ್ತು. ಪ್ರಾಣಿಗಳು ಫೀಡ್ ಮತ್ತು ನೀರಿನ ಜಾಹೀರಾತಿನ ಪೂರೈಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದವು. Gachon ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾನಿಲಯದಲ್ಲಿ (GIACUC-R2019003) ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಆರೈಕೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆಗಾಗಿ ಪ್ರಸ್ತುತ ನೈತಿಕ ನಿಯಮಗಳನ್ನು ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾಗಿ ಅನುಸರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅಧ್ಯಯನವನ್ನು ತನಿಖಾಧಿಕಾರಿ-ಕುರುಡು ಮತ್ತು ಸಮಾನಾಂತರ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅನಿಮಲ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪೆರಿಮೆಂಟಲ್ ಎಥಿಕ್ಸ್ ಕಮಿಟಿಯ ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಗಳ ಪ್ರಕಾರ ನಾವು ದಯಾಮರಣ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿದ್ದೇವೆ.
2.4 MIA ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸೆ
ಇಲಿಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ 4 ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅವುಗಳೆಂದರೆ ಶಾಮ್, ಕಂಟ್ರೋಲ್, ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್ ಮತ್ತು ಎ. ಲ್ಯಾಪ್ಪಾ. 2% ಐಸೊಫ್ಲೋರೇನ್ O2 ಮಿಶ್ರಣದೊಂದಿಗೆ ಅರಿವಳಿಕೆ ಮಾಡಲಾಗಿದ್ದು, ಪ್ರಯೋಗಾತ್ಮಕ OA ಗೆ ಕಾರಣವಾಗಲು 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ಅನ್ನು ಇಂಟ್ರಾ-ಆರ್ಟಿಕ್ಯುಲರ್ ಆಗಿ ಮೊಣಕಾಲಿನ ಕೀಲುಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಚುಚ್ಚಲಾಯಿತು. ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು: ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ಶಾಮ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು AIN-93G ಮೂಲ ಆಹಾರದೊಂದಿಗೆ ಮಾತ್ರ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್ ಗುಂಪನ್ನು AIN-93G ಆಹಾರದಲ್ಲಿ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾದ ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್ (3 mg/kg) ಜೊತೆಗೆ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು A. Lappa (300 mg/kg) ಜೊತೆಗೆ AIN-93G ಆಹಾರಕ್ಕೆ A. Lappa 300 mg/kg ಗುಂಪನ್ನು ನಿಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿದಿನವೂ 190-210 ಗ್ರಾಂ ದೇಹದ ತೂಕಕ್ಕೆ 15-17 ಗ್ರಾಂ ದರದಲ್ಲಿ OA ಇಂಡಕ್ಷನ್ ದಿನದಿಂದ 24 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳನ್ನು ಮುಂದುವರೆಸಲಾಯಿತು.
2.5 ತೂಕದ ಮಾಪನ
OA ಇಂಡಕ್ಷನ್ ನಂತರ, ಇಲಿಗಳ ಹಿಂಗಾಲುಗಳ ತೂಕವನ್ನು ಹೊರುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಮಾಪನವನ್ನು ಅಸಮರ್ಥತೆ-MeterTester600 (IITC ಲೈಫ್ ಸೈನ್ಸ್, ವುಡ್‌ಲ್ಯಾಂಡ್ ಹಿಲ್ಸ್, CA, USA) ನಿಗದಿಪಡಿಸಿದಂತೆ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಹಿಂಗಾಲುಗಳ ಮೇಲೆ ತೂಕದ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ: ತೂಕವನ್ನು ಹೊರುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ (%)
