ಅಸ್ಥಿಸಂಧಿವಾತ (OA) 65 ವರ್ಷಕ್ಕಿಂತ ಮೇಲ್ಪಟ್ಟ ವಯಸ್ಸಾದ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಕ್ಷೀಣಗೊಳ್ಳುವ ಮೂಳೆ ಜಂಟಿ ಕಾಯಿಲೆಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ [
1]. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, OA ರೋಗಿಗಳಿಗೆ ಹಾನಿಗೊಳಗಾದ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್, ಉರಿಯೂತಗೊಂಡ ಸೈನೋವಿಯಂ ಮತ್ತು ಸವೆದ ಕೊಂಡ್ರೊಸೈಟ್‌ಗಳು ಇರುವುದು ಪತ್ತೆಯಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ನೋವು ಮತ್ತು ದೈಹಿಕ ತೊಂದರೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ [
2]. ಕೀಲುಗಳಲ್ಲಿನ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಉರಿಯೂತದಿಂದ ಕ್ಷೀಣಿಸುವುದರಿಂದ ಸಂಧಿವಾತ ನೋವು ಪ್ರಧಾನವಾಗಿ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಗಂಭೀರವಾಗಿ ಹಾನಿಗೊಳಗಾದಾಗ ಮೂಳೆಗಳು ಒಂದಕ್ಕೊಂದು ಡಿಕ್ಕಿ ಹೊಡೆದು ಅಸಹನೀಯ ನೋವು ಮತ್ತು ದೈಹಿಕ ತೊಂದರೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು [
3]. ನೋವು, ಊತ ಮತ್ತು ಕೀಲುಗಳ ಬಿಗಿತದಂತಹ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಉರಿಯೂತದ ಮಧ್ಯವರ್ತಿಗಳ ಒಳಗೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ. OA ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ, ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಮತ್ತು ಸಬ್‌ಕಾಂಡ್ರಲ್ ಮೂಳೆಯ ಸವೆತಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಉರಿಯೂತದ ಸೈಟೊಕಿನ್‌ಗಳು ಸೈನೋವಿಯಲ್ ದ್ರವದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ [
4]. OA ರೋಗಿಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೊಂದಿರುವ ಎರಡು ಪ್ರಮುಖ ದೂರುಗಳು ನೋವು ಮತ್ತು ಸೈನೋವಿಯಲ್ ಉರಿಯೂತ. ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರಸ್ತುತ OA ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಗುರಿಗಳು ನೋವು ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು. [
5]. ಸ್ಟಿರಾಯ್ಡಲ್ ಅಲ್ಲದ ಮತ್ತು ಸ್ಟಿರಾಯ್ಡಲ್ ಔಷಧಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ ಲಭ್ಯವಿರುವ OA ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳು ನೋವು ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತವನ್ನು ನಿವಾರಿಸುವಲ್ಲಿ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಿವೆ, ಆದರೆ ಈ ಔಷಧಿಗಳ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಬಳಕೆಯು ಹೃದಯರಕ್ತನಾಳದ, ಜಠರಗರುಳಿನ ಮತ್ತು ಮೂತ್ರಪಿಂಡದ ಅಪಸಾಮಾನ್ಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಂತಹ ತೀವ್ರ ಆರೋಗ್ಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಬೀರುತ್ತದೆ [
6]. ಹೀಗಾಗಿ, ಅಸ್ಥಿಸಂಧಿವಾತದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಅಡ್ಡಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಔಷಧವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ.
ನೈಸರ್ಗಿಕ ಆರೋಗ್ಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು ಸುರಕ್ಷಿತ ಮತ್ತು ಸುಲಭವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಾಗುವುದರಿಂದ ಹೆಚ್ಚು ಜನಪ್ರಿಯವಾಗುತ್ತಿವೆ [
7]. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಕೊರಿಯನ್ ಔಷಧಿಗಳು ಸಂಧಿವಾತ ಸೇರಿದಂತೆ ಹಲವಾರು ಉರಿಯೂತದ ಕಾಯಿಲೆಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಿವೆ [
8]. ಆಕ್ಲೆಂಡ್ಯಾ ಲಪ್ಪಾ ಡಿಸಿ. ನೋವು ನಿವಾರಣೆ ಮತ್ತು ಹೊಟ್ಟೆಯನ್ನು ಶಮನಗೊಳಿಸಲು ಕಿ ಪರಿಚಲನೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವಂತಹ ಔಷಧೀಯ ಗುಣಗಳಿಗೆ ಹೆಸರುವಾಸಿಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕವಾಗಿ ನೈಸರ್ಗಿಕ ನೋವು ನಿವಾರಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ [
9]. ಹಿಂದಿನ ವರದಿಗಳು ಎ. ಲಪ್ಪಾ ಉರಿಯೂತ ನಿವಾರಕವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ [
10,
11], ನೋವು ನಿವಾರಕ [
12], ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ವಿರೋಧಿ [
13], ಮತ್ತು ಗ್ಯಾಸ್ಟ್ರೋಪ್ರೊಟೆಕ್ಟಿವ್ [
14] ಪರಿಣಾಮಗಳು. ಎ. ಲಪ್ಪಾದ ವಿವಿಧ ಜೈವಿಕ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳು ಅದರ ಪ್ರಮುಖ ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತವೆ: ಕೋಸ್ಟುನೊಲೈಡ್, ಡಿಹೈಡ್ರೊಕೊಸ್ಟಸ್ ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್, ಡೈಹೈಡ್ರೊಕೊಸ್ಟುನೊಲೈಡ್, ಕೋಸ್ಟುಸ್ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್, α-ಕೋಸ್ಟಲ್, ಸೌಸುರಿಯಾ ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್ ಮತ್ತು ಕೋಸ್ಟುಸ್ಲ್ಯಾಕ್ಟೋನ್ [
15]. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಕೋಸ್ಟುನೊಲೈಡ್ ಲಿಪೊಪೊಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್ (LPS) ನಲ್ಲಿ ಉರಿಯೂತದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ ಎಂದು ಹೇಳುತ್ತವೆ, ಇದು NF-kB ಮತ್ತು ಶಾಖ ಆಘಾತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಾರ್ಗದ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಮೂಲಕ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಫೇಜ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ [
16,
17]. ಆದಾಗ್ಯೂ, OA ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ A. ಲಪ್ಪಾದ ಸಂಭಾವ್ಯ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ಯಾವುದೇ ಅಧ್ಯಯನವು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿಲ್ಲ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸಂಶೋಧನೆಯು (ಮೋನೋಸೋಡಿಯಂ-ಅಯೋಡೋಅಸೆಟೇಟ್) MIA ಮತ್ತು ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ-ಪ್ರೇರಿತ ದಂಶಕ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು OA ವಿರುದ್ಧ A. ಲಪ್ಪಾದ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದೆ.
ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ OA ಯ ನೋವಿನ ನಡವಳಿಕೆಗಳು ಮತ್ತು ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಮೋನೋಸೋಡಿಯಂ-ಅಯೋಡೋಅಸಿಟೇಟ್ (MIA) ಪ್ರಸಿದ್ಧವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ [
18,
19,
20]. ಮೊಣಕಾಲಿನ ಕೀಲುಗಳಿಗೆ ಚುಚ್ಚಿದಾಗ, MIA ಕೊಂಡ್ರೊಸೈಟ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅಸ್ತವ್ಯಸ್ತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತದ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಮತ್ತು ಸಬ್‌ಕಾಂಡ್ರಲ್ ಮೂಳೆ ಸವೆತ, OA ಯ ಪ್ರಮುಖ ಲಕ್ಷಣಗಳು [
18]. ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲದಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ ಬರೆಯುವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಬಾಹ್ಯ ನೋವಿನ ಸಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಎಂದು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಉರಿಯೂತದ ನೋವನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅಳೆಯಬಹುದು [
19]. ಮೌಸ್ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಫೇಜ್ ಕೋಶ ರೇಖೆ, RAW264.7, ಉರಿಯೂತಕ್ಕೆ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಜನಪ್ರಿಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. LPS ನೊಂದಿಗೆ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ, RAW264 ಮ್ಯಾಕ್ರೋಫೇಜ್‌ಗಳು ಉರಿಯೂತದ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ಮತ್ತು IL-6 ನಂತಹ ಹಲವಾರು ಉರಿಯೂತದ ಮಧ್ಯವರ್ತಿಗಳನ್ನು ಸ್ರವಿಸುತ್ತವೆ [
20]. ಈ ಅಧ್ಯಯನವು MIA ಪ್ರಾಣಿ ಮಾದರಿ, ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರಾಣಿ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು LPS-ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದ RAW264.7 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ OA ವಿರುದ್ಧ A. ಲಪ್ಪಾದ ವಿರೋಧಿ-ನೋಸೆಸೆಪ್ಟಿವ್ ಮತ್ತು ವಿರೋಧಿ ಉರಿಯೂತ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿದೆ.
2. ಸಾಮಗ್ರಿಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳು
2.1. ಸಸ್ಯ ವಸ್ತು
ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಎ. ಲಪ್ಪಾ ಡಿಸಿಯ ಒಣಗಿದ ಮೂಲವನ್ನು ಎಪುಲಿಪ್ ಫಾರ್ಮಾಸ್ಯುಟಿಕಲ್ ಕಂಪನಿ ಲಿಮಿಟೆಡ್ (ಸಿಯೋಲ್, ಕೊರಿಯಾ) ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ಇದನ್ನು ಗಚನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕೊರಿಯನ್ ಮೆಡಿಸಿನ್‌ನ ಕರ್ನಲ್ ಆಫ್ ಹರ್ಬಲ್ ಫಾರ್ಮಕಾಲಜಿ ವಿಭಾಗದ ಪ್ರೊ. ಡೊನ್ಗುನ್ ಲೀ ಗುರುತಿಸಿದ್ದಾರೆ ಮತ್ತು ವೋಚರ್ ಮಾದರಿ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು 18060301 ಎಂದು ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
2.2. ಎ. ಲಪ್ಪಾ ಸಾರದ HPLC ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
A. ಲಪ್ಪಾವನ್ನು ರಿಫ್ಲಕ್ಸ್ ಉಪಕರಣವನ್ನು ಬಳಸಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು (ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರು, 100 °C ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳು). ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ-ಒತ್ತಡದ ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ ಸಾಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. −80 °C ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಫ್ರೀಜ್-ಒಣಗಿದ ನಂತರ A. ಲಪ್ಪಾ ಸಾರವು 44.69% ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿತ್ತು. 1260 ಇನ್ಫಿನಿಟಿⅡ HPLC-ಸಿಸ್ಟಮ್ (Agilent, Pal Alto, CA, USA) ಬಳಸಿ ಸಂಪರ್ಕಗೊಂಡ HPLC ಯೊಂದಿಗೆ A. ಲಪ್ಪಾದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ವರ್ಣೀಯ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ, EclipseXDB C18 ಕಾಲಮ್ (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ಅನ್ನು 35 °C ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಒಟ್ಟು 100 mg ಮಾದರಿಯನ್ನು 10 mL 50% ಮೆಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸೋನಿಕೇಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 0.45 μm ನ ಸಿರಿಂಜ್ ಫಿಲ್ಟರ್ (ವಾಟರ್ಸ್ ಕಾರ್ಪ್., ಮಿಲ್ಫೋರ್ಡ್, MA, USA) ಮೂಲಕ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ಸಂಯೋಜನೆಯು 0.1% ಫಾಸ್ಪರಿಕ್ ಆಮ್ಲ (A) ಮತ್ತು ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ (B) ಆಗಿತ್ತು ಮತ್ತು ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಯಿತು: 0–60 ನಿಮಿಷ, 0%; 60–65 ನಿಮಿಷ, 100%; 65–67 ನಿಮಿಷ, 100%; 67–72 ನಿಮಿಷ, 0% ದ್ರಾವಕ B 1.0 mL/min ಹರಿವಿನ ದರದೊಂದಿಗೆ. 10 μL ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು 210 nm ನಲ್ಲಿ ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು. ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ತ್ರಿವಳಿಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು.
2.3. ಪ್ರಾಣಿಗಳ ವಸತಿ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆ
5 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸಿನ ಗಂಡು ಸ್ಪ್ರಾಗ್-ಡಾವ್ಲಿ (SD) ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು 6 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸಿನ ಗಂಡು ICR ಇಲಿಗಳನ್ನು ಸ್ಯಾಮ್ಟಕೊ ಬಯೋ ಕೊರಿಯಾ (ಗ್ಯೊಂಗ್ಗಿ-ಡೊ, ಕೊರಿಯಾ) ನಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಯಿತು. ಸ್ಥಿರ ತಾಪಮಾನ (22 ± 2 °C) ಮತ್ತು ಆರ್ದ್ರತೆ (55 ± 10%) ಮತ್ತು 12/12 ಗಂಟೆಗಳ ಬೆಳಕು/ಕತ್ತಲೆ ಚಕ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಕೋಣೆಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರಯೋಗ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುವ ಮೊದಲು ಒಂದು ವಾರಕ್ಕೂ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಸ್ಥಿತಿಯ ಪರಿಚಯವಿತ್ತು. ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಆಹಾರ ಮತ್ತು ನೀರಿನ ಉಚಿತ ಪೂರೈಕೆ ಇತ್ತು. ಗ್ಯಾಚನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದಲ್ಲಿ (GIACUC-R2019003) ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಆರೈಕೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆಗಾಗಿ ಪ್ರಸ್ತುತ ನೈತಿಕ ನಿಯಮಗಳನ್ನು ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾಗಿ ಅನುಸರಿಸಲಾಯಿತು. ಈ ಅಧ್ಯಯನವನ್ನು ತನಿಖಾಧಿಕಾರಿ-ಅಂಧ ಮತ್ತು ಸಮಾನಾಂತರ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಾಣಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ನೀತಿ ಸಮಿತಿಯ ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಗಳ ಪ್ರಕಾರ ನಾವು ದಯಾಮರಣ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿದ್ದೇವೆ.
2.4. MIA ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸೆ
ಇಲಿಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ 4 ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅವುಗಳೆಂದರೆ ಶಾಮ್, ಕಂಟ್ರೋಲ್, ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್ ಮತ್ತು ಎ. ಲಪ್ಪಾ. 2% ಐಸೊಫ್ಲೋರೇನ್ O2 ಮಿಶ್ರಣದಿಂದ ಅರಿವಳಿಕೆ ನೀಡಲಾಗಿದ್ದು, ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ OA ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವಂತೆ ಇಲಿಗಳಿಗೆ 50 μL MIA (40 mg/m; ಸಿಗ್ಮಾ-ಆಲ್ಡ್ರಿಚ್, ಸೇಂಟ್ ಲೂಯಿಸ್, MO, USA) ಅನ್ನು ಮೊಣಕಾಲಿನ ಕೀಲುಗಳೊಳಗೆ ಒಳ-ಕೀಲಿನ ಮೂಲಕ ಚುಚ್ಚಲಾಯಿತು. ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ನಡೆಸಲಾಯಿತು: ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ನಕಲಿ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು AIN-93G ಮೂಲ ಆಹಾರದೊಂದಿಗೆ ಮಾತ್ರ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಯಿತು. ಕೇವಲ, ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್ ಗುಂಪನ್ನು AIN-93G ಆಹಾರದಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾದ ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್ (3 mg/kg) ನೊಂದಿಗೆ ಒದಗಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು A. ಲಪ್ಪಾ 300 mg/kg ಗುಂಪನ್ನು A. ಲಪ್ಪಾ (300 mg/kg) ನೊಂದಿಗೆ ಪೂರಕವಾದ AIN-93G ಆಹಾರಕ್ಕೆ ನಿಯೋಜಿಸಲಾಯಿತು. OA ಪ್ರಚೋದನೆಯ ದಿನದಿಂದ 24 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳನ್ನು ಮುಂದುವರಿಸಲಾಯಿತು, ಪ್ರತಿದಿನ 190–210 ಗ್ರಾಂ ದೇಹದ ತೂಕಕ್ಕೆ 15–17 ಗ್ರಾಂ ದರದಲ್ಲಿ.
2.5. ತೂಕ ಬೇರಿಂಗ್ ಮಾಪನ
OA ಪ್ರಚೋದನೆಯ ನಂತರ, ಇಲಿಗಳ ಹಿಂಗಾಲುಗಳ ತೂಕ-ಹೊರುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಮಾಪನವನ್ನು ನಿಗದಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಇನ್‌ಕ್ಯಾಪಸಿಟೆನ್ಸ್-ಮೀಟರ್‌ಟೆಸ್ಟರ್600 (ಐಐಟಿಸಿ ಲೈಫ್ ಸೈನ್ಸ್, ವುಡ್‌ಲ್ಯಾಂಡ್ ಹಿಲ್ಸ್, ಸಿಎ, ಯುಎಸ್‌ಎ) ಬಳಸಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಹಿಂಗಾಲುಗಳ ಮೇಲಿನ ತೂಕ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ: ತೂಕ ಹೊರುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ (%)
