ರೀಡ್ ಬರ್ನರ್ ಡಿಫ್ಯೂಸರ್ಗಳಿಗೆ ಸಗಟು ಡಿಫ್ಯೂಸರ್ ಸಾರಭೂತ ತೈಲವನ್ನು ತಯಾರಿಸುವ ಮೇಣದಬತ್ತಿ ಮತ್ತು ಸೋಪ್ಗಾಗಿ ಶುದ್ಧ ಸಪೋಶ್ನಿಕೋವಿಯಾ ಡಿವಾರಿಕಾಟಾ ಎಣ್ಣೆ
ಸಣ್ಣ ವಿವರಣೆ:
2.1. SDE ಯ ತಯಾರಿ
SD ನ ರೈಜೋಮ್ಗಳನ್ನು ಹ್ಯಾನ್ಹೆರ್ಬ್ ಕಂ. (ಗುರಿ, ಕೊರಿಯಾ) ನಿಂದ ಒಣಗಿದ ಮೂಲಿಕೆಯಾಗಿ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕೊರಿಯಾ ಇನ್ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಟ್ ಆಫ್ ಓರಿಯೆಂಟಲ್ ಮೆಡಿಸಿನ್ (KIOM) ನ ಡಾ. ಗೋ-ಯಾ ಚೋಯ್ ಅವರು ಸಸ್ಯ ಸಾಮಗ್ರಿಗಳನ್ನು ವರ್ಗೀಕರಣವಾಗಿ ದೃಢಪಡಿಸಿದರು. ವೋಚರ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು (ಸಂಖ್ಯೆ 2014 SDE-6) ಕೊರಿಯನ್ ಹರ್ಬೇರಿಯಂ ಆಫ್ ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಹರ್ಬಲ್ ರಿಸೋರ್ಸಸ್ನಲ್ಲಿ ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. SD (320 ಗ್ರಾಂ) ನ ಒಣಗಿದ ರೈಜೋಮ್ಗಳನ್ನು 70% ಎಥೆನಾಲ್ನೊಂದಿಗೆ ಎರಡು ಬಾರಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು (2 ಗಂ ರಿಫ್ಲಕ್ಸ್ನೊಂದಿಗೆ) ಮತ್ತು ಸಾರವನ್ನು ನಂತರ ಕಡಿಮೆ ಒತ್ತಡದಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಕಷಾಯವನ್ನು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ, ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 4 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕಚ್ಚಾ ಆರಂಭಿಕ ವಸ್ತುಗಳಿಂದ ಒಣಗಿದ ಸಾರದ ಇಳುವರಿ 48.13% (w/w).
2.2 ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಹೈ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (HPLC) ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
HPLC ಸಿಸ್ಟಮ್ (ವಾಟರ್ಸ್ ಕಂ., ಮಿಲ್ಫೋರ್ಡ್, MA, USA) ಮತ್ತು ಫೋಟೋಡಿಯೋಡ್ ಅರೇ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. SDE ಯ HPLC ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ, ಪ್ರೈಮ್-O-ಗ್ಲುಕೋಸಿಲ್ಸಿಮಿಫುಜಿನ್ ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಅನ್ನು ಕೊರಿಯಾ ಪ್ರಮೋಷನ್ ಇನ್ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಟ್ ಫಾರ್ ಟ್ರೆಡಿಷನಲ್ ಮೆಡಿಸಿನ್ ಇಂಡಸ್ಟ್ರಿ (ಜಿಯೊಂಗ್ಸಾನ್, ಕೊರಿಯಾ) ನಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ, ಮತ್ತುಸೆಕೆಂಡ್-ಓ-ಗ್ಲುಕೋಸಿಲ್ಹಮೌಡಾಲ್ ಮತ್ತು 4′-O-β-ಡಿ-ಗ್ಲುಕೋಸಿಲ್-5-O-ಮೀಥೈಲ್ವಿಸಮ್ಮಿನಾಲ್ ಅನ್ನು ನಮ್ಮ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಿಂದ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ, ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ NMR ಮತ್ತು MS ನಿಂದ.
SDE ಮಾದರಿಗಳನ್ನು (0.1 mg) 70% ಎಥೆನಾಲ್ (10 mL) ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಲಾಗಿದೆ. XSelect HSS T3 C18 ಕಾಲಮ್ (4.6 × 250 mm, 5) ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತುμm, ವಾಟರ್ಸ್ ಕಂ., ಮಿಲ್ಫೋರ್ಡ್, MA, USA). ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತವು ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್ (A) ಮತ್ತು 0.1% ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ನೀರಿನಲ್ಲಿ (B) 1.0 mL/min ನ ಹರಿವಿನ ದರದಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಮಲ್ಟಿಸ್ಟೆಪ್ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಬಳಸಲಾಗಿದೆ: 5% A (0 ನಿಮಿಷ), 5-20% A (0-10 ನಿಮಿಷ), 20% A (10-23 ನಿಮಿಷ), ಮತ್ತು 20-65% A (23-40 ನಿಮಿಷಗಳು ) ಪತ್ತೆ ತರಂಗಾಂತರವನ್ನು 210-400 nm ನಲ್ಲಿ ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 254 nm ನಲ್ಲಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪ್ರಮಾಣವು 10.0 ಆಗಿತ್ತುμಎಲ್O-ಗ್ಲುಕೋಸಿಲ್ಸಿಮಿಫುಜಿನ್), 31.125 mg/mL (4′-O-β-ಡಿ-ಗ್ಲುಕೋಸಿಲ್-5-O-ಮೀಥೈಲ್ವಿಸಮ್ಮಿನಾಲ್), ಮತ್ತು 31.125 mg/mL (ಸೆಕೆಂಡ್-ಓ-ಗ್ಲುಕೋಸಿಲ್ಹಮೌಡಾಲ್) ಮೆಥನಾಲ್ನಲ್ಲಿ ಮತ್ತು 4 ° C ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
2.3 ವಿರೋಧಿ ಉರಿಯೂತ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ
2.3.1. ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಚಿಕಿತ್ಸೆ
RAW 264.7 ಕೋಶಗಳನ್ನು ಅಮೇರಿಕನ್ ಟೈಪ್ ಕಲ್ಚರ್ ಕಲೆಕ್ಷನ್ (ATCC, Manassas, VA, USA) ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 1% ಪ್ರತಿಜೀವಕಗಳು ಮತ್ತು 5.5% FBS ಹೊಂದಿರುವ DMEM ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಯಲಾಗಿದೆ. ಕೋಶಗಳನ್ನು 5% CO2 ನ ಆರ್ದ್ರ ವಾತಾವರಣದಲ್ಲಿ 37 ° C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕೋಶಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಲು, ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ತಾಜಾ DMEM ಮಾಧ್ಯಮದಿಂದ ಮತ್ತು ಲಿಪೊಪೊಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್ (LPS, ಸಿಗ್ಮಾ-ಆಲ್ಡ್ರಿಚ್ ಕೆಮಿಕಲ್ ಕಂ., ಸೇಂಟ್ ಲೂಯಿಸ್, MO, USA) 1 ನಲ್ಲಿ ಬದಲಾಯಿಸಲಾಯಿತು.μSDE (200 ಅಥವಾ 400) ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಅಥವಾ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ g/mL ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆμg/mL) ಹೆಚ್ಚುವರಿ 24 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ.
2.3.2. ನೈಟ್ರಿಕ್ ಆಕ್ಸೈಡ್ (NO), ಪ್ರೊಸ್ಟಗ್ಲಾಂಡಿನ್ E2 (PGE2), ಟ್ಯೂಮರ್ ನೆಕ್ರೋಸಿಸ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್-α(TNF-α), ಮತ್ತು ಇಂಟರ್ಲ್ಯೂಕಿನ್-6 (IL-6) ಉತ್ಪಾದನೆ
ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು SDE ಯೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 24 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ LPS ನೊಂದಿಗೆ ಉತ್ತೇಜಿಸಲಾಯಿತು. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನದ ಪ್ರಕಾರ ಗ್ರೀಸ್ ಕಾರಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನೈಟ್ರೈಟ್ ಅನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ಯಾವುದೇ ಉತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ [12]. ಉರಿಯೂತದ ಸೈಟೊಕಿನ್ಗಳ ಸ್ರವಿಸುವಿಕೆ PGE2, TNF-α, ಮತ್ತು IL-6 ಅನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ELISA ಕಿಟ್ (R&D ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು) ಬಳಸಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. NO ಮತ್ತು ಸೈಟೊಕಿನ್ ಉತ್ಪಾದನೆಯ ಮೇಲೆ SDE ಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು 540 nm ಅಥವಾ 450 nm ನಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಲಾಕ್ ಎನ್ವಿಷನ್ ಬಳಸಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ™ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್ (ಪರ್ಕಿನ್ ಎಲ್ಮರ್).
2.4 ಆಂಟಿಆಸ್ಟಿಯೊಆರ್ಥ್ರೈಟಿಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವಿವೋದಲ್ಲಿ
2.4.1. ಪ್ರಾಣಿಗಳು
ಗಂಡು ಸ್ಪ್ರಾಗ್-ಡಾವ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು (7 ವಾರಗಳ ಹಳೆಯದು) Samtako Inc. (ಒಸಾನ್, ಕೊರಿಯಾ) ನಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 12-ಗಂಟೆಗಳ ಬೆಳಕು/ಗಾಢ ಚಕ್ರದೊಂದಿಗೆ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು.°C ಮತ್ತು% ಆರ್ದ್ರತೆ. ಇಲಿಗಳಿಗೆ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಆಹಾರ ಮತ್ತು ನೀರನ್ನು ಒದಗಿಸಲಾಯಿತುಆಡ್ ಲಿಬಿಟಮ್. ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ನ್ಯಾಷನಲ್ ಇನ್ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಟ್ ಆಫ್ ಹೆಲ್ತ್ (NIH) ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಗಳಿಗೆ ಅನುಸಾರವಾಗಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಡೇಜಿಯೋನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ (ಡೇಜಿಯೋನ್, ರಿಪಬ್ಲಿಕ್ ಆಫ್ ಕೊರಿಯಾ) ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಆರೈಕೆ ಮತ್ತು ಬಳಕೆ ಸಮಿತಿಯಿಂದ ಅನುಮೋದಿಸಲಾಗಿದೆ.
2.4.2. ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ MIA ಜೊತೆ OA ಯ ಇಂಡಕ್ಷನ್
ಅಧ್ಯಯನದ ಪ್ರಾರಂಭದ ಮೊದಲು ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸಾ ಗುಂಪುಗಳಿಗೆ ನಿಯೋಜಿಸಲಾಯಿತು (ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿಗೆ). MIA ದ್ರಾವಣ (3 mg/50μ0.9% ಸಲೈನ್ನ ಎಲ್) ಅನ್ನು ಕೆಟಮೈನ್ ಮತ್ತು ಕ್ಸೈಲಾಜಿನ್ ಮಿಶ್ರಣದಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ ಅರಿವಳಿಕೆ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಬಲ ಮೊಣಕಾಲಿನ ಒಳ-ಕೀಲಿನ ಜಾಗಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ಚುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇಲಿಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ ನಾಲ್ಕು ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ: (1) MIA ಚುಚ್ಚುಮದ್ದು ಇಲ್ಲದ ಲವಣಯುಕ್ತ ಗುಂಪು, (2) MIA ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನೊಂದಿಗೆ MIA ಗುಂಪು, (3) MIA ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನೊಂದಿಗೆ SDE- ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಪಡೆದ ಗುಂಪು (200 mg/kg) ಮತ್ತು (4 ) ಇಂಡೊಮೆಥಾಸಿನ್- (IM-) ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಗುಂಪು (2 mg/kg) MIA ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ನೊಂದಿಗೆ. MIA ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ಗೆ 1 ವಾರ ಮೊದಲು 4 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಇಲಿಗಳನ್ನು SDE ಮತ್ತು IM ನೊಂದಿಗೆ ಮೌಖಿಕವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ SDE ಮತ್ತು IM ನ ಡೋಸೇಜ್ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಉದ್ಯೋಗಿಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ.10,13,14].
2.4.3. ಹಿಂಡ್ಪಾವ್ ತೂಕ-ಬೇರಿಂಗ್ ವಿತರಣೆಯ ಅಳತೆಗಳು
OA ಇಂಡಕ್ಷನ್ ನಂತರ, ಹಿಂಡ್ಪಾವ್ಗಳ ತೂಕ-ಹೊರುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದಲ್ಲಿನ ಮೂಲ ಸಮತೋಲನವು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸಿತು. ಅಸಮರ್ಥತೆಯ ಪರೀಕ್ಷಕವನ್ನು (ಲಿಂಟನ್ ಇನ್ಸ್ಟ್ರುಮೆಂಟೇಶನ್, ನಾರ್ಫೋಕ್, ಯುಕೆ) ತೂಕ-ಹೊರುವ ಸಹಿಷ್ಣುತೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಇಲಿಗಳನ್ನು ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ಅಳತೆಯ ಕೊಠಡಿಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು. ಹಿಂಗಾಲುಗಳಿಂದ ಭಾರ ಹೊರುವ ಬಲವು 3 ಸೆಕೆಂಡುಗಳ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಸರಾಸರಿಯಾಗಿದೆ. ತೂಕದ ವಿತರಣಾ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಕೆಳಗಿನ ಸಮೀಕರಣದಿಂದ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ: [ಬಲ ಹಿಂಗಾಲು/(ಬಲ ಹಿಂಗಾಲು ಮೇಲಿನ ತೂಕ + ಎಡ ಹಿಂಗಾಲಿನ ತೂಕ)] × 100 [15].
2.4.4. ಸೀರಮ್ ಸೈಟೊಕಿನ್ ಮಟ್ಟಗಳ ಅಳತೆಗಳು
ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 1,500 ಗ್ರಾಂನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 4 ° C ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ; ನಂತರ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬಳಕೆಯವರೆಗೆ −70 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. IL-1 ನ ಮಟ್ಟಗಳುβ, IL-6, TNF-α, ಮತ್ತು ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿರುವ PGE2 ಅನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ R&D ಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ (ಮಿನ್ನಿಯಾಪೋಲಿಸ್, MN, USA) ನಿಂದ ELISA ಕಿಟ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.
2.4.5. ರಿಯಲ್-ಟೈಮ್ ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಆರ್ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
TRI ಕಾರಕ® (ಸಿಗ್ಮಾ-ಆಲ್ಡ್ರಿಚ್, ಸೇಂಟ್ ಲೂಯಿಸ್, MO, USA) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮೊಣಕಾಲಿನ ಅಂಗಾಂಶದಿಂದ ಒಟ್ಟು RNA ಅನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಗಿದೆ, cDNA ಗೆ ರಿವರ್ಸ್-ಟ್ರ್ಯಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು SYBR ಹಸಿರು (ಅನ್ವಯಿಕ ಜೈವಿಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು) ಜೊತೆಗೆ TM ಒನ್ ಸ್ಟೆಪ್ RT PCR ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು PCR-ಆಂಪ್ಲಿಫೈಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. , ಗ್ರ್ಯಾಂಡ್ ಐಲ್ಯಾಂಡ್, NY, USA). ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಅನ್ನು ಅಪ್ಲೈಡ್ ಬಯೋಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ 7500 ರಿಯಲ್-ಟೈಮ್ PCR ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಅಪ್ಲೈಡ್ ಬಯೋಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್, ಗ್ರ್ಯಾಂಡ್ ಐಲ್ಯಾಂಡ್, NY, USA) ಬಳಸಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರೈಮರ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಬ್-ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ1. ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ (ಅನ್ವಯಿಕ ಜೈವಿಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು, ಫಾಸ್ಟರ್, CA, USA) ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಹೊಂದಿರುವ TaqMan® ಯುನಿವರ್ಸಲ್ PCR ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣದೊಂದಿಗೆ ಮಾದರಿ cDNAಗಳ ಅಲಿಕಾಟ್ಗಳು ಮತ್ತು GAPDH cDNA ಯ ಸಮಾನ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲಾಗಿದೆ. PCR ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು 50 ° C ನಲ್ಲಿ 2 ನಿಮಿಷಗಳು, 94 ° C ನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳು, 95 ° C ನಲ್ಲಿ 15 ಸೆಗಳು ಮತ್ತು 40 ಚಕ್ರಗಳಿಗೆ 60 ° C ನಲ್ಲಿ 1 ನಿಮಿಷ. ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಜೀನ್ನ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ತುಲನಾತ್ಮಕ Ct (ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಪ್ಲಾಟ್ ಮತ್ತು ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡ್ ನಡುವಿನ ಅಡ್ಡ-ಬಿಂದುವಿನಲ್ಲಿ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡ್ ಸೈಕಲ್ ಸಂಖ್ಯೆ) ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಅಸ್ಥಿಸಂಧಿವಾತ (OA) ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದ ಮಸ್ಕ್ಯುಲೋಸ್ಕೆಲಿಟಲ್ ಡಿಸಾರ್ಡರ್ ಮತ್ತು ವಯಸ್ಸಾದವರಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದ ಕ್ಷೀಣಗೊಳ್ಳುವ ಜಂಟಿ ಕಾಯಿಲೆಯಾಗಿದೆ.1]. OA ಎಂಬುದು ಗಾಯ, ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯದ ನಷ್ಟ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತದ ಮತ್ತು ಉರಿಯೂತದ ಮಾರ್ಗಗಳ ಅನಿಯಂತ್ರಣದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಒಂದು ಸ್ಥಿತಿಯಾಗಿದೆ.2,3]. ಇದು ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ ಸೈನೋವಿಯಲ್ ಕೀಲುಗಳ ಕೀಲಿನ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಮತ್ತು ಸಬ್ಕಾಂಡ್ರಲ್ ಮೂಳೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಜಂಟಿ ವೈಫಲ್ಯಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ನಡಿಗೆ ಮತ್ತು ನಿಂತಿರುವುದು ಸೇರಿದಂತೆ ತೂಕವನ್ನು ಹೊತ್ತಾಗ ನೋವು ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ.4].
OA ಗೆ ಯಾವುದೇ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಇಲ್ಲ, ಏಕೆಂದರೆ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ನಾಶವಾದ ನಂತರ ಅದನ್ನು ಪುನಃಸ್ಥಾಪಿಸಲು ತುಂಬಾ ಕಷ್ಟ.5]. ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಗುರಿಗಳು ನೋವನ್ನು ನಿವಾರಿಸುವುದು, ಜಂಟಿ ಚಲನಶೀಲತೆಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳುವುದು ಅಥವಾ ಸುಧಾರಿಸುವುದು, ಕೀಲುಗಳ ಬಲವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದು ಮತ್ತು ರೋಗದ ಅಶಕ್ತಗೊಳಿಸುವ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು. OA ಯ ಔಷಧೀಯ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳು ರೋಗಿಯ ಜಂಟಿ ಕಾರ್ಯ ಮತ್ತು ಜೀವನದ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ನೋವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವ ಗುರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. OA ಯಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ನಾಶವು ಮುಖ್ಯ ಘಟನೆಯಾಗಿದ್ದರೂ, ಕಾಲಜನ್ನ ಅವನತಿಯು ಮೂಲಭೂತ ಘಟನೆಯಾಗಿದ್ದು ಅದು ಉರಿಯೂತದ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ OA ಯ ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗದ ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ.6,7]. ಉರಿಯೂತದ ಮತ್ತು ಕೊಂಡ್ರೊಪ್ರೊಟೆಕ್ಟಿವ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯೊಂದಿಗಿನ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳು OA ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ ನೋವನ್ನು ನಿವಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಸಮಗ್ರತೆಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಆದ್ದರಿಂದ, ಉರಿಯೂತವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು OA ನಿರ್ವಹಣೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಯೋಜನಕಾರಿಯಾಗಿದೆ. ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು OA ಯ ಪ್ರಗತಿಯ ಮೇಲೆ ಗಿಡಮೂಲಿಕೆ ಸಂಪನ್ಮೂಲಗಳಿಗೆ ರಕ್ಷಣಾತ್ಮಕ ಪಾತ್ರಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ, ಕೊಂಡ್ರೊಸೈಟ್ ಉರಿಯೂತ ಮತ್ತು ಮತ್ತಷ್ಟು ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ನಾಶವನ್ನು ತಗ್ಗಿಸುವ ವಿಷಯದಲ್ಲಿ, ಕೀಲು-ಸಂಬಂಧಿತ ಅಂಗಾಂಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ಮಾಡುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಮೂಲಕ, ಕೀಲು ನೋವು ತಗ್ಗಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.8].
ನ ಮೂಲಸಪೋಶ್ನಿಕೋವಿಯಾ ಡಿವರಿಕಾಟಾಕೊರಿಯಾ ಮತ್ತು ಚೀನಾದಲ್ಲಿ ತಲೆನೋವು, ನೋವು, ಉರಿಯೂತ ಮತ್ತು ಸಂಧಿವಾತದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಔಷಧದಲ್ಲಿ ಶಿಶ್ಕಿನ್ (ಉಂಬೆಲಿಫೆರೇ) ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ.9,10]. ವೈವಿಧ್ಯಮಯ ಔಷಧೀಯ ಪರಿಣಾಮಗಳುಸಪೋಶ್ನಿಕೋವಿಯಾ ಡಿವರಿಕಾಟಾ(SD) ಉರಿಯೂತದ, ನೋವು ನಿವಾರಕ, ಜ್ವರನಿವಾರಕ ಮತ್ತು ಆಂಟಿಆರ್ಥ್ರಿಟಿಕ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿದೆ.9,11]. ಕಾಲಜನ್-ಪ್ರೇರಿತ ಸಂಧಿವಾತದ ಮೌಸ್ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಎಸ್ಡಿ ಕ್ರೋಮೋನ್ ಸಾರವು ಸಂಭಾವ್ಯ ಆಂಟಿರುಮಟಾಯ್ಡ್ ಸಂಧಿವಾತ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಧ್ಯಯನವು ತೋರಿಸಿದೆ.10]; ಆದಾಗ್ಯೂ, ಉರಿಯೂತದ ಮತ್ತು ಆಂಟಿಆರ್ಥ್ರೈಟಿಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸಲು ಕೆಲವು ಅಧ್ಯಯನಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗಿದೆಸಪೋಶ್ನಿಕೋವಿಯಾ ಡಿವರಿಕಾಟಾಸಾರ (SDE).
ಆದ್ದರಿಂದ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನವು SD ಯ 70% ಎಥೆನಾಲ್ ಸಾರದ ಉರಿಯೂತದ ಮತ್ತು ಆಂಟಿಯೋಆರ್ಥ್ರೈಟಿಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದೆ. ಮೊದಲಿಗೆ, SDE ಯ ಉರಿಯೂತದ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತುವಿಟ್ರೋದಲ್ಲಿLPS-ಪ್ರೇರಿತ RAW 264.7 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ. ಮುಂದೆ, SDE ಯ ಆಂಟಿಯೋಆರ್ಥ್ರೈಟಿಸ್ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ತೂಕ-ಬೇರಿಂಗ್ ವಿತರಣೆ, ಕೀಲಿನ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ನ ಅವನತಿ ಮತ್ತು ಮೊನೊಸೋಡಿಯಂ ಅಯೋಡೋಸೆಟೇಟ್- (MIA-) ಪ್ರೇರಿತ OA ಯ ಇಲಿ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಉರಿಯೂತದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.